Evaluanción in vitro de la citotoxicidad del extracto de Croton lechleri Müll. Arg. (Euphorbiaceae) y su equivalencia con compuestos quinoleicos y avermectina

Autores/as

DOI:

https://doi.org/10.33448/rsd-v11i15.36809

Palabras clave:

Croton; Fitoterapia; Hemólisis; Plantas medicinales; Toxicidad.

Resumen

Las especies del género Croton L., especialmente Croton lechleri Müll. Arg. popularmente conocido como "sangre de dragón", son utilizadas con diversos fines terapéuticos por la población brasileña. Los ensayos in vitro que evalúan la citotoxicidad de esta planta en células sanas son escasos. Por lo tanto, este estudio tuvo como objetivo evaluar la toxicidad del extracto etanólico de la corteza de C. lechleri y compararlo con compuestos disponibles comercialmente como compuestos quinoleicos y avermectinas. La prueba hemolítica se realizó agregando el extracto suspendido de glóbulos rojos en solución salina a un hematocrito del 10% con concentraciones decrecientes. El ensayo de citotoxicidad se realizó en células VERO mantenidas en medio de cultivo RPMI suplementado con suero fetal bovino, las que se añadieron 7 concentraciones diluidas las 1/2 de la solución madre de 500µg/mL del extracto crudo de C. lechleri y los fármacos Cloroquina, Hidroxicloroquina e Ivermectina. La hemólisis se analizó utilizando UV/VIS a intervalos de 30, 60 y 120 minutos. Citotoxicidad después de 72 horas por ensayo de reducción de resazurina. Los resultados mostraron que el extracto de C. lechleri a diferentes concentraciones y tiempos, mostró baja o nula toxicidad para glóbulos rojos. En el ensayo de citotoxicidad, el extracto presentó CC₅₀ de 218.9 µg/mL, el CQ, HCQ e IVe de 128,5; 191,6 y 32,9 µg/mL, respectivamente. Se concluyó que el extracto etanólico de corteza de C. lechleri no presentó hemólisis significativa y que presentó citotoxicidad moderada contra células VERO, demostrando que este producto natural es potencialmente seguro para uso popular.

Citas

Almeida, F. K. V. Novais, V. P. Salvi, J. D. O. & Marson, R. F. (2019). Avaliação tóxica, citotóxica e mutagênica/genotóxica de um extrato comercial de sangue do dragão (Croton lechleri Müll. Arg.). Revista Fitos, 13(1), 29. DOI: https://doi.org/10.17648/2446-4775.2019.605

Alonso-Castro, A. J., Ortiz-Sánchez, E., Domínguez, F., López-Toledo, G., Chávez, M., Ortiz-Tello, A. D. J. & García-Carrancá, A. (2012). Antitumor effect of Croton lechleri Müll. Arg. (Euphorbiaceae). Journal of Ethnopharmacology, 140(2), 438–442. DOI: https://doi.org/10.1016/J.JEP.2012.01.009

Alonso, J. (2008). Fitomedicina: curso para profissionais da área da saúde (1st ed.). Pharmabooks.

Amaral, A. C. F. & Barnes, R. A. (1997). Alkaloids of Croton celtidifolius. Planta Medica. Botanical Journal of the Linnean Society, 141, 399–436.

Amaral, R. G., Andrade, L. N., Severino, P., Araújo, S. S., Santos, M. I. S., Dias, A. S., Moraes Filho, M. O., O’Pessoa, C., Carvalho, A. A., Thomazzi, S. M. & Estevam, C. S. (2018). Investigation of the possible antioxidant and anticancer effects of Croton argyrophyllus (Euphorbiaceae). Chemical Engineering Transactions, 64(January), 253–258. DOI: https://doi.org/10.3303/CET1864043

Ammerman, N. C., Beier-Sexton, M. & Azad, A. F. (2008). Growth and maintenance of VERO cell lines. Current Protocols in Microbiology, SUPPL. 11, 1–7. DOI: https://doi.org/10.1002/9780471729259.mca04es11

Azevedo, K., Alechandre, A., Lima, Á., Campos, C. A., Costa, J., Pereira, M. A., Leite, A., Melo, T. & Lima, A. (2008). Guia para a extração de sangue de grado (Croton lechleri Müll. Arg). Disponível em: https://ipam.org.br/wp-content/uploads/2008/04/guia_para_a_extrac%CC%A7a%CC%83o_de_sangue_de_grado_.pdf

Barratt-Due, A., Olsen, I. C., Nezvalova-Henriksen, K., Kåsine, T., Lund-Johansen, F., Hoel, H., Holten, A. R., Tveita, A., Mathiessen, A., Haugli, M., Eiken, R., Kildal, A. B., Berg, Å., Johannessen, A., Heggelund, L., Dahl, T. B., Skåra, K. H., Mielnik, P., Le, L. A. K., Aukrust, P. (2021). Evaluation of the Effects of Remdesivir and Hydroxychloroquine on Viral Clearance in COVID-19: A Randomized Trial. Annals of Internal Medicine, 174(9), 1261–1269. DOI: https://doi.org/10.7326/M21-0653

Belcavello, L., Cunha, M., Andrade, M. & Batitucci, M. (2012). Citotoxicidade e danos ao DNA induzidos pelo extrato de Zornia diphylla, uma planta medicinal Cytotoxicity and DNA damages induced by the Zornia diphylla extract , a medicinal plant. Natureza on Line, 10, 140–145.

Bettega, P. V. C., Czlusniak, G. R., Piva, R., Namba, E. L., Ribas, C. R., Grégio, A. M. T. & Rosa, E. A. R. (2011). Fitoterapia: dos canteiros ao balcão da farmácia. Archives of Oral Research, 7(1), 89–97. DOI: https://doi.org/10.7213/AOR.V7I1.23149

Buonfrate, D., Chesini, F., Martini, D., Roncaglioni, M. C., Ojeda Fernandez, M. L., Alvisi, M. F., de Simone, I., Rulli, E., Nobili, A., Casalini, G., Antinori, S., Gobbi, M., Campoli, C., Deiana, M., Pomari, E., Lunardi, G., Tessari, R. & Bisoffi, Z. (2022). High-dose ivermectin for early treatment of COVID-19 (COVER study): a randomised, double-blind, multicentre, phase II, dose-finding, proof-of-concept clinical trial. International Journal of Antimicrobial Agents, 59(2). DOI https://doi.org/10.1016/J.IJANTIMICAG.2021.106516

Brasil (2014). Agencia Nacional de Vigilância Sanitária – ANVISA. Resolução RDC nº 26, de maio de 2014: Dispões sobre o registro de medicamentos fitorerápicos e o registro e a notificação de produtos tradicionais fitoterápicos. Diário Oficial da União, Seção1(1). 1-34. Disponível em: hhtps://bvms.saude.gov.br/bvs/saudelegis/anvisa/2014/rdc0026_13_05_2014.pdf

Cai, Y., Chen, Z. P. & Phillipson, J. D. (1993a). Diterpenes from Croton lechleri Müll. Arg. Phytochemistry, 32(3), 755–760. DOI: https://doi.org/10.1016/S0031-9422(00)95166-5

Cai, Y., Chen, Z. P. & Phillipson, J. D. (1993b). Clerodane diterpenoids from Croton lechleri Müll. Arg. . Phytochemistry, 34(1), 265–268. DOI: https://doi.org/10.1016/S0031-9422(00)90816-1

Calvo-Calle, J. M., Moreno, A., Eling, W. M. C. & Nardin, E. H. (1994). In Vitro Development of Infectious Liver Stages of P. yoelii and P. berghei Malaria in Human Cell Lines. Experimental Parasitology, 79(3), 362–373. DOI: https://doi.org/10.1006/EXPR.1994.1098

Carvalho, E. B. Borges, É. L., Carlos, L. M. B., Silva, M. A. M., Magalhães, S. M. M., Gomes, F. V. B. A. F., Carvalho, M. J. C., Quixadá, A. T. S. & Pitombeira, M. H. S. (2007). Efeito da bomba de infusão de soluções sobre o grau de hemólise em concentrados de hemácias. Revista Brasileira de Hematologia e Hemoterapia, 29(2), 149–152. DOI: https://doi.org/10.1590/S1516-84842007000200013

Caruzo, M.B.R, Secco, R.S., Medeiros, D., Rijna, R., Torres, D.S.C., Santos, R.F.D., Pereira, A.P.N., Rossine, Y., Lima, L.R., Muniz Filho., Valduga, E. Croton in Flora e Funga do Brasil. Jardim Botânico do Rio de Janeiro. Disponível em: <https://floradobrasil.jbrj.gov.br/FB22688>. Acesso em: 27 out. 2022.

Castro, I. B., Câmara, G. B., Pontes, J. F., Viana, D. L., Souza, R. P., Silva Nobrega, E. D., Lira, R. B. B. & Barbosa, L. S. L. T. (2020). Estratégias nutricionais no tratamento do diabetes mellitus: revisão bibliográfica. Research, Society and Development, 9(2), 26. DOI: https://doi.org/10.33448/rsd-v9i2.2193

Doyno, C., Sobieraj, D. M. & Baker, W. L. (2020). Toxicity of chloroquine and hydroxychloroquine following therapeutic use or overdose. Clinical Toxicology, 59(1), 12–23. DOI: https://doi.org/10.1080/15563650.2020.1817479

Eisenbrand, G., Pool-Zobel, B., Baker, V., Balls, M., Blaauboer, B. J., Boobis, A., Carere, A., Kevekordes, S., Lhuguenot, J. C., Pieters, R., & Kleiner, J. (2002). Methods of in vitro toxicology. Food and Chemical Toxicology, 40(2–3), 193–236. DOI: https://doi.org/10.1016/S0278-6915(01)00118-1

Fernandes, A. F. C. (2019). Caracterização físico-química da droga vegetal, estufo fitoquímico e farmacológico de Cnidoscolus quercifolius Pohl (Euphorbiaceae) [Disseratação de mestrado, Universidade Estadual da Paraíba-UEPB].

Gil, A.C. Como elaborar projetos de pesquisa. 5. Ed. São Paulo: Editora Atlas, 2010.

Gupta, S., Vohra, S., Sethi, K., Gupta, S., Bera, B. C., Kumar, S. & Kumar, R. (2022). In vitro anti-trypanosomal effect of ivermectin on Trypanosoma evansi by targeting multiple metabolic pathways. Tropical Animal Health and Production, 54(4), 240. DOI: https://doi.org/10.1007/S11250-022-03228-1

Hill, A., Garratt, A., Levi, J., Falconer, J., Ellis, L., McCann, K., Pilkington, V., Qavi, A., Wang, J. & Wentzel, H. (2021). Retracted: Meta-analysis of Randomized Trials of Ivermectin to Treat SARS-CoV-2 Infection. Open Forum Infectious Diseases, 8(11). DOI: https://doi.org/10.1093/OFID/OFAB358

International Standard Organization. (2009). Biological evaluation of medical devices—part 5: tests for in vitro cytotoxicity (ISO 10993-5:2009). (3ª ed.). ISO.

Kory, P., Meduri, G. U., Varon, J., Iglesias, J. & Marik, P. E. (2021). Review of the Emerging Evidence Demonstrating the Efficacy of Ivermectin in the Prophylaxis and Treatment of COVID-19. American Journal of Therapeutics, 28, 299–318. Disponivel em: www.americantherapeutics.com

Li, R., Morris-Natschke, S. L. & Lee, K. H. (2016). Clerodane diterpenes: Sources, structures, and biological activities. In Natural Product Reports (Vol. 33, Issue 10, pp. 1166–1226). Royal Society of Chemistry. DOI: https://doi.org/10.1039/c5np00137d

Lopes, T. V., Félix, S. R., Schons, S. V. & Nobre, M. O. (2013). Dragon’s blood (Croton lechleri Müll. Arg.): an update on the chemical composition and medical applications of this natural plant extract. A review. Revista Brasileira de Higiene e Sanidade Animal, 7(2), 167–191. DOI: https://doi.org/10.5935/1981-2965.20130016

Lorenzi, h. & Matos, F.J.A. Plantas medicinais no Brasil: nativas e exóticas. 3. Ed. Nova Odessa-SP. Jardim Botânico Plantarum. 2021. p. 576.

Markowicz-Piasecka, M., Huttunen, K. M., Mikiciuk-Olasik, E., & Sikora, J. (2018). Biocompatible sulfenamide and sulfonamide derivatives of metformin can exert beneficial effects on plasma haemostasis. Chemico-Biological Interactions, 280, 15–27. DOI: https://doi.org/10.1016/J.CBI.2017.12.005

Milanowski, D. J., K Winter, R. E., F Elvin-Lewis, M. P. & Lewis, W. H. (2002). Geographic Distribution of Three Alkaloid Chemotypes of Croton lechleri Müll. Arg. DOI: https://doi.org/10.1021/np000270v

Navarro, M., Camprubí, D., Requena-Méndez, A., Buonfrate, D., Giorli, G., Kamgno, J., Gardon, J., Boussinesq, M., Mu ~ Noz, J. & Krolewiecki, A. (2020). Safety of high-dose ivermectin: a systematic review and meta-analysis. Journal of Antimicrobial Chermotherapy, 75, 827–834. DOI: https://doi.org/10.1093/jac/dkz524

Oliveira, V.B., Zuchetto, M., Oliveira, C.F., Paula, C.S., Duarte, A. F. F., Miguel, M. D. & Miguel, O. G. (2016). Efeito de diferentes técnicas extrativas no rendimento, atividade antioxidante, doseamentos totais e no perfil por clae-dad de dicksonia sellowiana (presl.). Hook, dicksoniaceae. Revista Brasileira de Plantas Medicinais, 18(1 suppl 1), 230–239. Disponível em: https://www.scielo.br/j/rbpm/a/zKMxjg3c3hJV8wqSfsPBGYJ/?lang=pt.

Paixão, M. S. (2018). Avaliação da toxicidade do extrato hidroalcoólico da entrecasca de Croton aryrophyllus Kunth. [Disseração de mestrado, Universidade Federal de Pernambuco-UFPE].

Papazisis, G., Siafis, S., Cepatyte, D., Giannis, D., Stamoula, E., Tzachanis, D. & Egberts, T. (2021). Safety profile of chloroquine and hydroxychloroquine: a disproportionality analysis of the FDA Adverse Event Reporting System database. European Review for Medical and Pharmacological Sciences, 25(19), 6003–6012. DOI: https://doi.org/10.26355/EURREV_202110_26878

Pereira, C. T., Pereira, M. E. T., Simão, K. L. A., Alves, M. S., Simão, B. L. A., Medeiros, M. A. A. Teles, Y. C. F., Anjos, R. M. Oliveira, H. M. B. F. Oliveira, V. F. Medeiros, C. I. S., Sousa, A. P. & Filho, A. A. O. (2020). Análise da citotoxicidade do extrato metanólico de Psidium guineense Swartz em células sanguíneas humanas. Research, Society and Development, 9(6), e61963093–e61963093. DOI: https://doi.org/10.33448/RSD-V9I6.3093

Pires, I. F. B., de Sousa, A. A., Lima, C. de A., Costa, J. D., Feitosa, M. H. A. & Costa, S. de M. (2017). Plantas medicinais: cultivo e transmissão de conhecimento em comunidade cadastrada na Estratégia Saúde da Família. Revista Brasileira de Pesquisa Em Saúde/Brazilian Journal of Health Research, 18(4), 37–45. DOI: https://doi.org/10.21722/rbps.v18i4.16729

Podsiedlik, M., Markowicz-Piasecka, M. & Sikora, J. (2020). Erythrocytes as model cells for biocompatibility assessment, cytotoxicity screening of xenobiotics and drug delivery. Chemico-Biological Interactions, 332, 109305. DOI: https://doi.org/10.1016/J.CBI.2020.109305

Rangel, M., Malpezzi, E. L. A., Susini, S. M. M. & Freitas, J. C. (1997). Hemolytic activity in extracts of the diatom Nitzschia. Toxicon. 35(2), 305-309. DOI: https://doi.org/10.1016/S0041-0101(96)00148-1

Reddy, C. S. S. S., Subramanyam, M. V. V., Vani, R. & Asha Devi, S. (2007). In vitro models of oxidative stress in rat erythrocytes: Effect of antioxidant supplements. Toxicology in Vitro, 21(8), 1355–1364. DOI: https://doi.org/10.1016/j.tiv.2007.06.010

Riss, T. L., Moravec, R. A., Niles, A. L., Duellman, S., Benink, H. A., Worzella, T. J. & Minor, L. (2016). Cell Viability Assays. Assay Guidance Manual, 1–25. Disponível em: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23805433

Rogero, S. O., Lugão, A. B., Ikeda, T. I. & Cruz, Á. S. (2003). Teste in vitro de citotoxicidade: estudo comparativo entre duas metodologias. Materials Research, 6(3), 317–320. DOI: https://doi.org/10.1590/s1516-14392003000300003

Sá, L. L. F. Silva, H. V. A. Nogueira, N. C., Oliveira, K. B. V. & Brito, M. R. M. (2018). Regulamentação de fitoterápicos no Brasil e perfil daqueles vendidos em uma farmácia de manipulação de Teresina-PI. Boletim Informativo Geum, 9(3), 1–9.

Salatino, A., Salatino, M. L. F. & Negri, G. (2007). Traditional uses, chemistry and pharmacology of Croton species (Euphorbiaceae). Journal of the Brazilian Chemical Society, 18(1), 11–33. DOI: https://doi.org/10.1590/S0103-50532007000100002

Santos, A. P. de A. Pacheco, S. G. A. & Teles, C. B. G. (2015). Efeito leishmanicida in vitro do látex de Croton lechleri Müll. Arg. (Euphorbiaceae). Revista de Ciencias Farmaceuticas Basica e Aplicada, 36(3), 413–418.

Schiar, V. P. P. Santos, D. B., Lüdtke, D. S., Vargas, F., Paixão, M. W., Nogueira, C. W., Zeni, G. & Rocha, J. B. T. (2007). Screening of potentially toxic chalcogens in erythrocytes. Toxicology in Vitro, 21(1), 139–145. DOI: https://doi.org/10.1016/j.tiv.2006.08.006

Silva, A. D. S. Melo e Silva, K., Neto, J. C. Oliveira Costa, V. C. Lunaf Pessôa, H., Tavares, J. F. Silva, M. S. & Andrade Cavalcante, F. (2016). Croton grewioides Baill. (Euphorbiaceae) Shows Antidiarrheal Activity in Mice. Pharmacognosy Research, 8(3), 202. DOI: https://doi.org/10.4103/0974-8490.181465

Sousa, A. P., Ferreira, M. D. L., Fernandes, D. A., Cordeiro, L. V., Souza, M. F. V., Pessoa, H. L. F., Filho, A. A. de O. & Sá, R. de C. S. (2021). In silico, in vitro and ex-vivo Toxicological Profiling of 5,7,4’-Trihydroxyflavone-8-C-β-Glucopyranoside - Vitexin. Revista de Ciências Farmacêuticas Básica e Aplicada, 42, 1–9. DOI: https://doi.org/10.4322/2179-443X.0709

Stefano, L., Ogburn, E. L., Ram, M., Scharfstein, D. O., Li, T., Khanal, P., Baksh, S. N., McBee, N., Gruber, J., Gildea, M. R., Goldenberg, N. A., Bennani, Y., Brown, S. M., Buckel, W. R., Clement, M. E., Mulligan, M. J., O’Halloran, J. A., Rauseo, A. M., Self, W. H., Freilich, D. (2022). Hydroxychloroquine/Chloroquine for the Treatment of Hospitalized Patients with COVID-19: An Individual Participant Data Meta-Analysis. MedRxiv. DOI: https://doi.org/10.1101/2022.01.10.22269008

Tedesco, M., Kuhn, A. W., Boligon, A. A., Laughinghouse IV, H. D., Athayde, M. L., Silva, A. C. F. & Tedesco, S. B. (2015). Chromatographic analysis, antiproliferative effect and genotoxicity of aqueous extracts of Citrus sinensis (L.) osbeck on the Allium cepa L. test system. Bioscience Journal, 31(4), 1213–1221. DOI: https://doi.org/10.14393/bj-v31n4a2015-23245

Wang, M., Cao, R., Zhang, L., Yang, X., Liu, J., Xu, M., Shi, Z., Hu, Z., Zhong, W. & Xiao, G. (2020). Remdesivir and chloroquine effectively inhibit the recently emerged novel coronavirus (2019-nCoV) in vitro. Cell Research, 30(3), 269. DOI: https://doi.org/10.1038/S41422-020-0282-0

Yang, J., Guo, Z., Liu, X., Liu, Q., Wu, M., Yao, X., Liu, Y., Cui, C., Li, H., Song, C., Liu, D. & Xue, L. (2020). Cytotoxicity Evaluation of Chloroquine and Hydroxychloroquine in Multiple Cell Lines and Tissues by Dynamic Imaging System and Physiologically Based Pharmacokinetic Model. Frontiers in Pharmacology, 11. DOI: https://doi.org/10.3389/FPHAR.2020.574720/FULL

Yao, X., Ye, F., Zhang, M., Cui, C., Huang, B., Niu, P., Liu, X., Zhao, L., Dong, E., Song, C., Zhan, S., Lu, R., Li, H., Tan, W. & Liu, D. (2020). In Vitro Antiviral Activity and Projection of Optimized Dosing Design of Hydroxychloroquine for the Treatment of Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 (SARS-CoV-2). Clinical Infectious Diseases, 71(15), 732–739. DOI: https://doi.org/10.1093/CID/CIAA237

Yokomizo, A. Y., Antoniazzi, M. M., Galdino, P. L., Azambuja, N., Jorge, S. A. C. & Pereira, C. A. (2004). Rabies Virus Production in High VERO Cell Density Cultures on Macroporous Microcarriers. Biotechnology and Bioengineering, 85(5), 506–515. DOI: https://doi.org/10.1002/bit.10917

Zevallos-Pollito, P. A. & Filho, M. T. (2007). Espécies lenhosas do gênero Croton L. (Euphorbiaceae) no Estado do Acre. Revista Brasileira de Biociências, 5(2), 177–179. DOI: http://www.ufrgs.br/seerbio/ojs/index.php/rbb/article/view/261/179

Publicado

11/11/2022

Cómo citar

SILVA, K. A. da; SILVA, A. L. do N.; GOMES, Y. R. M. dos S.; SÁ, M. K. S. de; MAGALHÃES, T. N.; ALVES, N. N. N.; RAMOS, R. A.; CASSEB, A. A.; MILITÃO, J. S. L. T.; MESQUITA, E. A. de. Evaluanción in vitro de la citotoxicidad del extracto de Croton lechleri Müll. Arg. (Euphorbiaceae) y su equivalencia con compuestos quinoleicos y avermectina. Research, Society and Development, [S. l.], v. 11, n. 15, p. e102111536809, 2022. DOI: 10.33448/rsd-v11i15.36809. Disponível em: https://www.rsdjournal.org/index.php/rsd/article/view/36809. Acesso em: 19 may. 2024.

Número

Sección

Ciencias Agrarias y Biológicas